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分散酶
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CAS號:42613-33-2
MDL:MFCD02253017
級別:BR
酶活:0.8 U/mg protein
外觀/性狀:白色粉末。
酶活定義:1U是在37度,pH 7.5的檢測條件下1分鐘釋放相當于1 umol酪氨酸的Folin陽性氨基酸或肽的酶量。
抑制劑: EDTA、EGTA、Hg2+、其他重金屬。血清不會抑制酶活性。
介紹:分散酶 (Dispase) 即為中性蛋白酶,是一種非特異性的金屬蛋白酶,用于從不同組織或器官中消化細胞外基質,釋放并制備原代單細胞;或用于細胞培養中的細胞收獲或接種轉移;也被用于防止懸浮細胞培養時的細胞意外結團。
常用的胰蛋白酶、膠原酶和鏈酶蛋白酶都屬于蛋白水解酶類,用于分散組織、分離細胞,但其對細胞傷害大,細胞在培養時不穩定,甚至引入支原體污染。 優點:
該酶作用迅速有效又溫和,不會傷害細胞膜,細胞能保持完整; 該酶為細菌來源,不含支原體或動物病毒污染; 對于溫度、pH的改變、以及血清成分都很穩定; 使用螯合劑或稀釋即可簡單滅活。Dispase 經稀釋后其活性就大大降低,這也方便了后續的培養。
使用方法: 用Hepes-buffered saline (50 mM Hepes/KOH pH 7.4, 150 mM NaCl)溶解Dispase至10 mg/ml,使用時用細胞培養液稀釋到0.6-2.4 U/ml。不推薦高于2.4 U/ml的工作濃度,可用0.22 um的無菌濾膜過濾除菌。溶液的保存方法: 配成溶液后,4度保存,2周內使用有效,-20度保存,2個月內使用有效,不要反復凍融;儲存液用Hepes鹽緩沖液稀釋后,4度保存,3天內使用有效。
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